Взаимодействие аква- и цианокобаламинов с бычьим сывороточным альбумином

Кобаламины (Cbl, витамин B12) являются одной из наиболее распространенных в природе групп металлсодержащих кофакторов, которые в организме млекопитающих принимают участие в синтезе метионина и изомеризации метилмалонил-КоА. Их поступление в организм и переработка до коферментных форм управляется последовательностью транспортных белков: гаптокоррин связывает кобаламины и участвует в их доставке до тонкого кишечника, перемещение кобаламинов из тонкого кишечника до энтероцитов регулируется внутренним фактором, а транспорт кобаламинов в кровяное русло осуществляется транскобаламином II [1]. Важно отметить, что взаимодействие кобаламинов с бычьим сывороточным альбумином (БСА), наиболее изученным и самым распространенным белком крови (70% от общего белкового состава), остается неизученным.

Целью данной работы являлось изучение взаимодействия аква- (H2OCbl) и цианоформ (CNCbl) кобаламина(Ш) с бычьим сывороточным альбумином методами флуоресценции и электронной спектроскопии поглощения. Установлено, что добавление избытка H2OCbl и CNCbl к раствору БСА не приводит к изменениям в электронном спектре поглощения в течение десяти минут после смешивания при 25 °С, что наблюдалось и при добавлении избытка БСА к растворам H2OCbl и CNCbl. Однако при добавлении H2OCbl и CNCbl к раствору БСА происходит тушение флуоресценции последнего при 335 нм, а также расщепление максимума эмиссии. Показано, что тушение флуоресценции в данном случае происходит, главным образом, по статическому механизму. Рассчитаны константы равновесия для образования комплексов БСА с H2OCbl и CNCbl. Установлено, что добавки БСА не оказывают влияния на скорость реакций замещения воды в H2OCbl глутатионом (при 25 °С, смешивание БСА с H2OCbl проводилось непосредственно перед введением глутатиона), что указывает на отсутствие взаимодействия БСА с P-положением Cbl(III).

Ионова Я.С.